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綿羊布魯氏菌PCR檢測試劑盒

綿羊布魯氏菌PCR檢測試劑盒

產(chǎn)品時間:2019-07-24

簡要描述:

酶聯(lián)生物綿羊布魯氏菌PCR檢測試劑盒品種齊全,質(zhì)量可靠、價格合理、信譽保證為基礎(chǔ),竭誠服務(wù)于事業(yè),秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)"的企業(yè)文化,具有良好的市場信譽,專業(yè)的銷售和技術(shù)服務(wù)團隊,深受廣大消費者的信任及喜愛,如對我司產(chǎn)品有任何疑惑可詢問我司業(yè)務(wù)人員!

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產(chǎn)品介紹:

產(chǎn)品名稱:綿羊布魯氏菌PCR檢測試劑盒

英文名稱:Brucella ovisPCR

 

 

準備物品:

清理液(A)                                   毫升

染色液(t B)                                 微升

稀釋液(C)                                   毫升

溶解液(tD)                                  毫升

產(chǎn)品說明書                                     1份

 

注意事項:

1.基礎(chǔ)程序;

2.擴增溫度和延伸溫度;

3.反應(yīng)時間;

4.循環(huán)次數(shù);

5.PCR 反應(yīng)液的配制;

6.PCR技術(shù)的基本原理;

7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);

8.PCR擴增產(chǎn)物;

9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

 

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,綿羊布魯氏菌PCR檢測試劑盒PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

 

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