ELISA試劑盒的溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃等。37℃是試驗室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的適宜溫度。在樹立ELISA方法作反響動力學(xué)研究時，試驗標(biāo)明，兩次抗原抗體反響一般在37℃經(jīng)1～2小時，產(chǎn)品的生成可達(dá)高峰。為加快反響，可進(jìn)步反響的溫度，有些試驗在43℃進(jìn)行，但不宜選用更高的溫度。但因所需時刻太長，在ELISA試劑盒中一般不予選用。
ELISA試劑盒實踐進(jìn)程操作技巧：
1）加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本，防止刮擦包被板底部，加樣進(jìn)程中防止液體外濺，血清殘留在反響孔壁上。
2）加樣器吸頭要清洗干凈，防止污染，加樣次第要與說明書共同，否則可導(dǎo)致成果過錯，試驗重復(fù)性差。
3）在進(jìn)行試驗前應(yīng)對試驗的物理參數(shù)有充沛的了解，如環(huán)境溫度、反響孵育溫度和孵育時刻、洗刷的次數(shù)等，要先檢查水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。
4）顯色液量不行過多，加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下，加顯色體系后要避光反響，顯色液量不能過多，防止顯色過強。
5）要確保加液量共同，在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量禁絕，造成顯色不一致，判別過錯。
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